人参皂苷Rd对组蛋白H3乙酰化的调控机制研究

摘要

目的：基于定量蛋白质组学分析和分子生物学实验验证,阐明人参皂苷Rd调控组蛋白H3乙酰化水平的作用机制. 方法：利用SILAC标记技术和LC-MS/MS检测人参皂苷Rd作用下HEK293T细胞蛋白质组的动态变化;通过对定量蛋白质组学数据库分析监测组蛋白乙酰转移酶HATs和组蛋白去乙酰转移酶HDACs的表达水平变化;利用siRNA进行knockdown实验以明确Rd对组蛋白H3K9和K18位点乙酰基修饰水平的调控作用. 结果：人参皂苷Rd处理HEK293T细胞后,组蛋白H3K9ac、H3K18ac水平降低,但催化修饰这两个位点的P300没有明显变化;同时人参皂苷Rd上调HDAC2的转录和表达水平上升,siHDAC2处理HEK293T细胞后,逆转了人参皂苷Rd对H3K9ac、H3K18ac的下调作用. 结论：人参皂苷Rd通过上调HDAC2,下调组蛋白H3K9和K18位赖氨酸位点的乙酰化水平,从而影响下游基因的转录激活.