老年大鼠GnRH1表观变化及琼玉膏延缓衰老的分子机制探讨

摘要

目的：通过对大鼠衰老相关基因mRNA和蛋白表达水平以及GnRHl基因甲基化的分析,观察琼玉膏干预D-半乳糖诱导的下丘脑神经元干细胞衰老模型成球能力、炎性因子及NF-κB表达的变化,揭示其延缓衰老作用及其可能分子机制 方法：比较6只老年大鼠和6只青年大鼠下丘脑衰老相关基因mRNA和蛋白表达水平,及其GnRHl基因甲基化情况;将8只新生SD大鼠下丘脑神经元干细胞分成四组,前8天分别对其进行原代培养;第9天起,A组继用培养基培养24h;B组加入10mg/mL D-半乳糖致衰24h;C组先加90μg/mL琼玉膏干预6h,再加l0mg/mL D-半乳糖致衰24h;D组先加45μg/mL琼玉膏干预6h,再加10mg/mLD-半乳糖致衰24h.观察各组细胞成球能力、TNF-αIL-1β、NF-κB的变化,探讨琼玉膏延缓衰老的分子机制. 结果：(1)GnRHl、Sirtl、DNMT1基因mRNA及蛋白表达水平在老年鼠中明显降低;(2)DNMT3a基因mRNA及蛋白表达水平在老年鼠和青年鼠之间无显著性差异;(3)老年鼠GnRH1基因出现部分甲基化,青年鼠GnRH1基因未出现甲基化;(4)D-半乳糖诱导下丘脑神经元干细胞衰老模型细胞成球能力降,TNF-a及IL-1β表达增加,NF-κB信号通路激活;(5)90μg/mL琼玉膏可显著恢复细胞成球能力,降低TNF-a及IL-lβ表达,抑制NF-κB转录活性. 结论：琼玉膏延缓衰老作用的可能分子机制在于抑制下丘脑神经元干细胞炎性细胞因子TNF-a、IL-1β的表达以及NF-κB的转录活性,进而逆转自然衰老进程中GnRHl基因甲基化及其mRNA表达水平的下降。