猪流行性腹泻病毒M蛋白的原核表达

摘要

近年来,猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)给哺乳仔猪造成了严重的损失.M蛋白是PEDV重要的跨膜结构蛋白,是基因工程疫苗和诊断试剂的理想抗原.本实验设计M基因的特异性引物,扩增M基因,将鉴定正确的重组质粒转化致BL21感受态细胞,IPTG诱导表达及条件的优化.结果表明,重组表达的融合蛋白PET-32a-M大小约为43kD,与预期大小相符.SDS-PAGE电泳分析发现,在IPTG浓度为1.0mmoL/L,温度为37°C,诱导时间为6h时,蛋白表达效果最佳.Western-Blot结果进一步显示,重组蛋白PET-32a-M在体外可以被成功表达.