松果菊苷靶向雄激素受体促进精子的生成

摘要

目的：松果菊苷(ECH)为管花肉苁蓉保护生殖损伤的有效成分,本研究对其作用途径、靶器官和作用机制进行了探索研究. 方法：为探究ECH的作用途径,分别给予5mg/kg、20mg/kg和80mg/kg剂量的ECH,以及15mg/kg丙酸睾酮(阳性对照组)和20mg/kg恩杂鲁胺(阴性对照组).利用HPLC法检测ECH的药代动力学参数及体内分布,利用实时荧光定量PCR仪、放射性免疫实验以及显微镜下观察实验检测精子质量、激素含量、激素调节途径下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达变化,激素生成途径中相关基因的表达变化,利用Western blot法检测雄激素受体(AR)在细胞质与核中的表达.利用ELISA、组织免疫荧光和分子对接的方式检测ECH与AR的结合情况. 结果：表明ECH可在下丘脑中检测出来.高剂量的ECH可显著提高精子的数量,对精子的运动能力和活性无显著性影响.ECH可提高T和LH的分泌,促进下丘脑-垂体-性腺轴上相关基因的表达,增加合成激素途径的基因(CYP11A1,CYP17A1,HSD3β,HSD17β和StAR)的表达.ECH能够抑制性结合到AR蛋白上,抑制下丘脑中AR从细胞质转移到细胞核中. 结论：ECH为管花肉苁蓉中的主要活性成分,可促进精子的总数,同时提高T和LH的合成分泌,其可进入下丘脑,抑制AR的转运进而抑制HPA轴的负反馈调节作用,刺激正反馈调节,增加LH和T的分泌,促进精子的生成.