表达EAVGP3/GP4的Marc-145细胞系的构建

摘要

本研究旨在通过慢病毒载体系统将EAVGP3/GP4分别转入Marc-145细胞中,建立能够稳定表达EAVGP3/4的Marc-145细胞系.采用PCR方法从EAV感染性克隆上扩增相应的病毒基因,通过酶切连接构建pLenti-EAV GP3/4-CMV-Hygro.将重组质粒与慢病毒包装质粒VSVG和psPAX2共转染293T细胞,包装表达EAV GP3/4的慢病毒,并用其感染Marc-145细胞.采用潮霉素B和终点稀释法筛选出稳定表达EAV GP3/4的Marc-145细胞系.为后续EAV基本结构蛋白,嵌合病毒的研究以及动脉炎病毒细胞嗜性的研究提供条件.

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