内脏脂肪素促C2C12细胞分化及相关信号通路

摘要

背景和目的：阻塞性睡眠呼吸障碍(OSA)以上气道肌肉塌陷为特征,而肥胖是OSA发生的重要危险因素,其机制与脂肪组织的堆积及脂肪因子对颏舌肌结构和功能的影响有关,本研究旨在探讨内脏脂肪素(Visfatin)对骨骼肌纤维形成的作用及其机制. 方法：不同浓度Visfatin(0μg/ml,0.25μg/ml,0.5μg/ml,1μg/ml,2.5μg/ml,5μg/ml)作用分化时的C2C12细胞72h后,用免疫蛋白印记法检测总重链肌球蛋白(myosin heavy chain,MHC),重链肌球蛋白I型(MHC I),Ⅱa型(MHCⅡa)及Ⅱb型(MHCⅡb)表达,免疫荧光检测MHC的表达.以Visfatin(5p g/ml)作用分化时的C2C12细胞,观察不同时间点(24h,48h,72h,120h)MHC,MHC I,MHCⅡa,MHC lib表达情况.进一步以Visfatin(5p g/ml)作用分化时的C2C12细胞72h后用免疫蛋白印记检测p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-AKT473、p-AKT308、AKT、p-AMPK、AMPKs Myod、Myf5、MyoG、Myf6、Mef2A、Mef2C、Mef2D的表达情况. 结果:Visfatin作用分化时的C2C12细胞72h后，可促进MHC,MHCⅠ, MHCⅡa, MHCⅡb的表达，且随着Visfatin浓度增加表达量递增;分析Visfatin5μg/ml作用分化时的C2C12细胞不同时间点的变化，发现Visfatin促骨骼肌纤维形成的作用以72h最显著;进一步以Visfatin5 ug/ml作用分化时的C2C12细胞72h后发现，p-AKT473,p-AKT308,p-AMPK表达降低，Myod,MyfS表达增高，p-p38,p38,p-ERK,ERK,MyoG,Myf6,Mef2A,Mef2C,Mef2D表达未见明显改变。 结论:Visfatin可促进分化时的C2C12细胞各型重链肌球蛋白的表达，其机制可能与AKT、AMPK通路有关。