一株降解树脂细菌的鉴定及发酵条件的优化

摘要

将具有降解天然树脂能力的菌株Z75进行16SrDNA分子生物学鉴定,通过对菌株Z75基因组的提取,利用细菌的通用引物1,通用引物2,设计特定的反应体系和条件进行16SrDNA扩增,得到菌株Z75的16SrDNA基因序列大小在1500bp左右.同时利用生物信息学的方法对菌株Z75进行进化树分析,得出:菌株Z75与Enterobacter pulveris亲缘性最近,同源性达到99％以上,最终确定菌株Z75为Enterobacter pulveris.利用单因素选择实验以及响应面分析设计实验得出:最适pH7.7,最佳装液量为40ml/250ml三角瓶,而最优培养基配方和发酵条件为:葡萄糖1.25％,酵母粉3.85％,MgSO4 0.25％,K2HPO4 0.25％,NaCL 3 g,H2O 1L,pH 7.63,底物树脂颗粒大小0.200 g,接种量3.5％,接种菌龄OD600=1.300,200 r/min,36℃发酵38 h.再经过最后的培养基和发酵条件的优化后,降解率从6.5％提高到了22.49％,提高了约3.5倍.