人疱疹病毒PCR-基因芯片技术快速诊断儿童疱疹性脑炎

摘要

目的建立一种能同时快速检测临床常见人疱疹病毒的新技术，探讨儿童疱疹性脑炎的快速诊断新方法。方法以人疱疹病毒DNA多聚酶基因区为靶序列，设计多重引物和寡核苷酸探针，制成基因芯片，建立可同时检测单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1、HSV-2)、水痘-带状疱疹病毒(VZV)、爱泼斯坦-马尔病毒(EBV)、人巨细胞病毒(CMV)和人类疱疹病毒6型(HHV-6A、HHV-6B)等七种人疱疹病毒的多重PCR-基因芯片技术;对临床疑似病毒性脑炎的290份脑脊液标本进行PCR-基因芯片杂交检测，同时以临床常规疱疹类病毒系列荧光定量PCR试剂盒检测结果作比较。结果人疱疹病毒PCR-基因芯片能检测到10拷贝的上述疱疹类病毒数;各疱疹类病毒间的探针信号不相互干扰，细菌、真菌、乙肝病毒及人基因组DNA等对照品无杂交信号。用该多重PCR-基因芯片技术对临床疑为病毒性脑炎的290份脑脊液标本进行检测，共检出11份阳性标本，其中HSV-1 3例，HSV-2 2例，EBV 1例，CMV 2例，HHV-6A2例，HHV-6B 1例;HSV-2和CMV混合感染1例，阳性率为3.8％。与TaqMan荧光定量PCR法比较，其敏感度为91．7%，特异性为100％，正确诊断指数为0.917。结论建立的人疱疹病毒多重PCR-基因芯片技术，可同时检测7种人疱疹病毒，其检测快速简便、高通量，为儿童疱疹件瞒炎提供早期、特异的病原学诊断依据。