抗猫杯状病毒单克隆抗体的制备及双抗夹心ELISA检测方法的建立

摘要

目的:为了制备抗猫杯状病毒的单克隆抗体,并对其基本生物学特性进行鉴定.方法:差速离心、氯化铯密度梯度离心方法对猫杯状病毒(FCV)进行纯化,将纯化的猫杯状病毒作为抗原对BALB/c小鼠进行免疫,通过细胞融合和杂交瘤筛选技术建立抗猫杯状病毒单克隆抗体的杂交瘤系,鉴定单克隆抗体的亚型.结果:获得三株稳定分泌抗FCV McAb的杂交瘤细胞株,分别命名为D8、E5、H4,其中D8、E5为IgM亚类型抗体,H4为IgG2b亚类型抗体.获得的单克隆抗体与犬细小病毒(CPV)、猫细小病毒(FPV)、犬瘟热病毒(CDV)均无交叉反应.结论:根据E5、H4二株单抗对猫杯状病毒的识别位点不同,分别用来包被酶标板以及制备酶标二抗,建立了双抗夹心ELISA检测方法.