荧光共振能量转移技术检测Apelin受体与G蛋白的相互作用

摘要

目的：研究Apelin受体与G蛋白偶联的可能机制. 方法：以HEK293T细胞为研究对象,在此细胞系内建立过表达体系,利用荧光共振能量转移技术实时、动态、连续的监测Apelin受体与不同亚型的G蛋白相互作用. 结果：激动剂Apelin-13刺激前后,Apelin受体与Gαi1亚基的FRET值没有发生明显的变化(P＞0.05);Gαi2、Gαi3亚基的FRET值比刺激前明显升高(P＜0.05);加入激动剂Apelin-13后,Gαo、Gαq亚基的FRET值迅速降低(P＜0.05). 结论：Apelin受体在其激动剂Apelin-13诱导激活后,能够激活G蛋白的Gαi2、Gαi3、Gαo、Gαq亚基,并引起Gαi2、Gαi3亚基构象重排进而与Gγ亚基相互靠近,Gαo、Gαq亚基远离Gγ2亚基.