流感病毒性肺炎小鼠NK细胞毒性相关信号传导通路差异基因表达及两种不同治法方药的调控作用研究

摘要

目的：探讨流感病毒性肺炎小鼠NK细胞毒性相关信号传导通路差异基因表达及两种不同治法方药的调控作用研究.方法：制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组(N)、肺炎模型组(M)、奥司他韦对照组(Control)、疏风宣肺方高、中、低剂量组(SH、SM和SL),解表清里方高、中、低剂量组(SH、SM和SL).提取各组小鼠肺组织总RNA,采用基因组芯片筛选出NK细胞导致的细胞毒性信号传导通路相关的差异表达基因,并用荧光定量PCR对部分基因进行验证.结果：肺炎模型组肺组织中差异表达基因Fcgr3、Cd48、Cd244、Tyrobp、Hcst、zap70、Braf、Pik3r5、Pik3cg、Map2k1、Mapk1、Gzmb、Prf1、Fas、FasL、TNF、Casp3、Csf2、Bid明显上调,与空白组比较差异显著.疏风宣肺方中剂量组差异表达基因Cd244、Tyrobp、Hcst、Zap70、Braf、Pik3r5、Pik3cg、Map2k1、Mapk1、Gzmb、Prf1、Fas、FasL、TNF、Casp3、Csf2、Bid明显下调.应用荧光定量RT-PCR和western blot测定结果显示,疏风宣肺方中剂量组与解表清里方中剂量组对TNF-α mRNA及蛋白表达有显著抑制.结论：流感病毒在宿主细胞内增殖即成为带有病毒抗原的靶细胞,可被NK细胞识别并杀伤.流感病毒感染后激活NK细胞毒性信号传导通路的相关基因表达增加.治疗组疏风宣肺方下调NK细胞上述基因的表达优于解表清里方,其下调作用机制与疏风宣肺方治疗流感病毒性肺炎后体内靶抗原(即流感病毒感染细胞)明显减少,NK细胞识别活化作用减弱有关.