HMGB1对人肺成纤维细胞ERK1/2-NFκB信号通路的影响及补阳还五汤含药血清的干预作用

摘要

目的：观察肺纤维化中诱导免疫损伤的高迁移率族蛋白Box-1(High Mobility Group Box-1Protein,HMGB1)刺激人肺成纤维细胞(HFL1)后细胞外调节蛋白激酶1/2(Extracellular Regulated Protein Kinase1、2,ERK1/2)、核转录因子κB(Nuclear Factor kappa B,NFκB)信号通路活化情况,以及补阳还五汤含药血清对HMGB1刺激HFL1后以上信号通路的干预作用. 方法：采用含药血清药理学的实验方法,以5％、10％、15％、20％的补阳还五汤含药血清和空白血清来干预HMGB1诱导刺激的HFL1细胞.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞总蛋白中ERK1/2、胞浆胞核中NF-κB p65蛋白的表达. 结果：与空白组比较,HMGB1刺激组诱导后ERK1/2蛋白,胞浆胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达均增高(P＜0.05,P＜0.01);与20％空白血清预培养加HMGB1组比较,HMGB1刺激组诱导后ERK1/2蛋白,胞浆胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达均增高(P＜0.05);与HMGB1刺激组比较,补阳还五汤含药血清各组能够降低ERK1/2蛋白,胞浆胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达,其中15％和20％补阳还五汤含药血清组,降低ERK1/2的表达(P＜0.05);胞浆10％补阳还五汤含药血清组和胞核20％补阳还五汤含药血清组降低NF-κB p65蛋白的表达(P＜0.05);15％补阳还五汤含药血清组降低IL-1β的含量(P＜0.05). 结论：补阳还五汤含药血清在体外实验中,可抑制HMGB1引起的人肺成纤维细胞中ERK1/2/NF-κB信号通路的活化,减少IL-1β等炎症因子分泌.提示补阳还五汤可能通过调控人肺成纤维细胞中ERK1/2/NF-κB信号通路,防治肺纤维化的发生发展.