烟草提取物诱导小鼠肺气肿模型中骨髓水平内皮祖细胞c-Kit受体/steel因子相互作用的变化

摘要

目的:研究香烟提取物诱导小鼠肺气肿模型探讨相关机制。rn 方法:6周龄SPF级雄性C57 BL/6J小鼠随机被分为模型组和对照组，分别在实验第0,11及22天经腹腔注射香烟提取物或等容积的磷酸盐缓冲液。实验第28天测定小鼠肺功能后处死小鼠，收集组织及细胞标本。通过小鼠肺组织病理切片及肺功能评判肺气肿模型。免疫印迹及实时定量PCR测定小鼠肺组织c-Kit的基因及蛋白表达;应用红细胞裂解法分离小鼠骨髓细胞，通过流式技术测定小鼠骨髓非红细胞中内皮祖细胞及c-Kit(+)内皮祖细胞水平;ELISA法测定小鼠骨髓可溶性steel因子水平;免疫印迹及实时定量PCR测定小鼠骨髓steel因子级MMP-9的mRNA及蛋白表达;明胶酶谱法测定小鼠骨髓组织MMP-9的活性。rn 结果:经腹腔注射香烟提取物可以可以成功诱导小鼠肺气肿模型。肺气肿模型小鼠肺组织c-Kit的基因及蛋白表达显著减少。尽管模型组与对照组骨髓非红细胞数无统计学差异，但是模型组骨髓非红细胞中内皮祖细胞及c-Kit(+)内皮祖细胞数量显著降低。模型组骨髓可溶性steel因子水平显著降低，而且这种降低与骨髓组织steel因子的mRNA及蛋白表达的减少及MMP-9活性降低有关。尽管两组MMP-9的mRNA及蛋白表达无差异，但是模型组TIIVIP-1蛋白水平显著增加，MMP-9活性降低与TIMP-1的表达增加相关。rn 结论:内皮修复的关键环节--骨髓水平的内皮祖细胞c-Kit受体/steel因子相互作用在香烟提取物诱导小鼠肺气肿模型中被负性调节。