内质网应激相关因子IRE1α、CRT在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑皮质中的表达及参附注射液的干预作用

摘要

目的:观察内质网应激(ERS)相关因子IRE1α、CRT在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑皮质中的表达变化及参附注射液对其表达的影响,探讨参附注射液可能的脑保护机制.方法:将新生7日龄SD大鼠随机分为假手术组(S)和HIBD模型组,模型组又分为生理盐水对照组(C)、参附治疗组(SF).各组按照观测的时间点不同分为3h、6h、12h、24h、72h五个亚组,每个亚组10只.参照Rice法制备新生大鼠HIBD模型,在各个时间点断头取右侧皮质脑组织,HE染色光镜下观察脑组织病理变化;RT-PCR法检测皮层脑组织中IRE1α mRNA及CRT mRNA的表达变化;Western blot法测定IRE1α及CRT蛋白的表达变化.结果:1. RT-PCR:生理盐水对照组中IRE1α mRNA表达水平在3, 6, 12, 24h时间点较假手术组升高，且在6h达到高峰;CRT mRNA表达水平在3h开始增加，12h达到高峰，随后逐渐下降，72h时与假手术组比较差异仍有统计学意义。参附治疗组中IRE1α mRNA及CRT mRNA各时间点的表达量均较假手术组明显升高，表达趋势与生理盐水对照组一致，但在6, 12, 24, 72h时间点的表达量较生理盐水对照组升高明显。2. Western-bolt:生理盐水对照组和参附治疗组中各时间点IRE1α蛋白表达量均较假手术组升高，表达高峰在缺氧缺血后12h;而CRT蛋白表达则从HI后6h开始升高，24h达到高峰，72h有所下降，但仍高于假手术组。参附治疗组IRE1α和CRT蛋白表达量在6, 12, 24, 72h时间点较生理盐水对照组升高明显。结论:1.IRE1α, CRT参与了新生大鼠HIBD病理生理过程。2.参附注射液可能通过上调IER1α及CRT的表达来减轻新生大鼠缺氧缺血性脑损伤。