尼可地尔、美托洛尔、谷氨酰胺单独及联合用药对大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌细胞抗凋亡能力和保护性蛋白HSP70表达的影响

摘要

目的：研究尼可地尔(Nicorandil,Nic)、谷氨酰胺(glutamine,Glu)、美托洛尔(metoprolol,Met)三药联用对大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury,MIRI)后心肌细胞抗凋亡能力和保护性蛋白HSP70表达的影响.方法：将健康Wistar 雄性大鼠随机分为7组.即(1)假手术(sham)组;(2)缺血再灌注损伤(IR)组;(3)尼可地尔(Nic)组;(4)谷氨酰胺(Glu)组;(5)美托洛尔(Met)组;(6)尼可地尔、谷氨酰胺、美托洛尔联合用药(NGM)组;(7)尼可地尔、美托洛尔、谷氨酰胺联合用药低剂量(NGML)组.sham组只开胸,行冠状动脉左前降支(left anterior descending,LAD)穿线;IR组行心脏LAD 30 min 缺血/120 min再灌注程序(ischemia/reperfusion,I/R);药物预处理组则在I/R程序前30 min腹腔注射相应药物,Nic、Glu、Met的初始给药剂量为1mg/kg,1 ml/kg,1 mg/kg.TUNEL(terminal dexynucleotidyltransferase-mediated dUTP nick end labeling)法检测心肌细胞凋亡率,Western 印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax和保护性蛋白热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP 70)的表达情况.结果：IR组在缺血区有较高的细胞凋亡率(36.9±10.3％),凋亡相关蛋白表达Bcl-2/Bax值较低(0.14±0.08);和I/R组比较,药物预处理组的细胞凋亡率降低(P<0.01),Bcl-2/Bax值升高(P<0.01);与sham组比较,IR组的HSP70表达明显增多(P<0.01);与IR组相比,药物预处理组的HSP 70表达明显升高(P<0.01);与药物单用组相比,NGM组的HSP70表达更高(P<0.01).结论：对于大鼠在体心肌缺血再灌注损伤,尼可地尔、美托洛尔、谷氨酰胺联合用药组与药物单用组相比能明显降低细胞凋亡率,改善Bcl-2、Bax的异常表达;增加保护性蛋白HSP70的表达.