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载脂蛋白E模拟肽对脂多糖诱导的THP-1细胞白介素-6和白介素-10表达的调节作用

摘要

目的:研究载脂蛋白E(apoE)模拟肽对脂多糖(LPS)诱导的THP-1细胞白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)表达的调节作用.方法:自行设计了一条含23个氨基酸残基的apoE模拟肽(apoE23肽,LRKLRKRLVRLASHLRKLRKRLL),含有apoE LDL受体结合位点序列,固相合成后HPLC纯化,电喷雾质谱技术对合成肽分子量和氨基酸组成进行检测,结果与理论值一致.应用LPS诱导体外培养的人单核细胞株(THP-1细胞),通过加入apoE23肽进行干预,检测apoE23肽对LPS诱导的THP-1细胞表达IL-6和IL-10的调节作用.培养细胞上清液中IL-6和IL-10浓度采用ELISA检测,IL-6和IL-10 mRNA定量检测采用定量PCR法,统计方法采用方差分析.结果:培养24小时后,对照组(不加LPS和apoE23肽)THP-1细胞上清液IL-6和IL-10浓度分别为3.0±1.Opg/mL,0.4±0.4pg/mL;LPS诱导组分别为280.2±49.1pg/mL、3.3±0.1pg/mL明显高于对照组。与LPS诱导组比较,apoE23肽干预组的IL-6和IL-10浓度在24小时分别为88.5±10.0pg/mL、0.7±0.6pg/mL明显低于LPS组。结论:apoE23肽具有明显下调LPS诱导的THP-1细胞IL-6和IL-10 mRNA及蛋白表达作用,apoE23肽是一个潜在的免疫调节剂,其在动脉粥样硬化中的作用值得进一步研究。

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