CDX2在儿童AML中的表达及调控机制的研究

摘要

目的：原癌基因CDX2在成人AML中异常高表达,但其调控机制尚未清楚,在儿童AML中的表达和作用更未见研究报道.方法：利用实时定量RT-PCR技术检测CDX2在59例儿童AML患者骨髓标本和11例正常对照组标本的表达变化.通过生物信息学软件,筛选作用于CDX2的miRNA,双荧光实验、Western blot实验进一步验证其靶向性,细胞增殖实验分析其功能相关性.结果：①CDX2在儿童AML患儿中异常高表达,与正常对照组相比,初诊组、完全缓解组、复发组患儿CDX2的表达量分别是其735倍、115倍、3066倍,与初诊组患儿相比,复发组患儿CDX2的表达量是其4倍,而初诊组患儿CDX2的表达量却是完全缓解组患儿的6.4倍;②利用生物信息学软件,筛选出与CDX2基因配对较好的miRNA共5个,其中与CDX2的功能相关性较好的候选miRNA三个:miR-10a、miR-133a和miR-135a;③通过转染技术过表达或特异抑制候选miRNA在白血病细胞株中的表达,证实在该3个候选miRNA中其中miR-133a和miR-135a能够靶向调控CDX2,miR-133a和miR-135a能下调癌基因CDX2的表达,而抑制miR-133a和miR-135a的表达使CDX2的表达水平上升;④下调或上调miR-133a或miR-135a的表达能够促进或抑制白血病细胞株的增殖.结论：研究结果强烈提示在儿童AML中原癌基因CDX2受miR-133a和miR-135a调控;miR-133a,miR-135a和CDX2可作为潜在的白血病疗效监测的分子标记，并为将来设计将miR-133a,miR-135a和CDX2作为药靶治疗AML提供了实验依据，为治疗AML和改善预后提供了全新的思路。