人脐带间充质干细胞静脉移植后在梗阻性肾间质纤维化大鼠体内的分布

摘要

目的：观察异种UC-MSCs静脉移植的安全性及UC-MSCs在UUO大鼠体内的分布,为人UC-MSCs静脉移植治疗肾损伤大鼠的可行性提供理论依据.方法：1.冻存的UC-MSCs复苏、扩增,调整细胞浓度为5×106/ml备用.2.8周龄雌性SD大鼠84只随机分为4组,各21只:①单侧输尿管梗阻组:简称为UUO组.大鼠行左侧输尿管结扎术,术后7d尾静脉注射PBS1ml.②单侧输尿管梗阻+细胞移植组:简称为UUO+MSCs组,大鼠行左侧输尿管结扎术,术后7d尾静脉注射5×106UC-MSCs.③假手术组:简称为Sham组,手术入路方式同UUO组,进腹腔后分离左输尿管但不结扎输尿管,术后7d经尾静脉注射PBS1ml.④假手术+细胞移植组:简称为Sham+MSCs组,手术入路方式同UUO组,进腹腔后分离左输尿管但不结扎输尿管,术后7d尾静脉注射5×106UC-MSCs.3.四组大鼠分别于造模后14d、21d、28d共3个时间点各取7只杀鼠,造模后和杀鼠前均测量体重,杀鼠后收集血标本、肾脏、心脏、肝脏、脾脏和肺,行以下检查:①血标本检测血常规、血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶;②四组大鼠肾组织均行苏木精-伊红(HE)、过碘酸希夫反应(PAS)和Masson染色,光学显微镜下观察肾组织的形态学改变;③免疫组化染色检测四组大鼠心、肝、脾、肺、肾组织MAB1281(标记人UC-MSCs)阳性表达细胞,光镜下观察并计数阳性细胞个数.结果：①各时间点Sham+MSCs组的体重增长、血常规、谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平与Sham组比较差异没有显著性意义(P＞0.05).②UUO组和UUO+MSCs组结扎侧肾脏随时间的延长,间质纤维化程度逐步加重,肾小球无明显病变.③四组大鼠心、肝、脾、肺大体标本肉眼观察均无明显异常.Sham+MSCs组心、肝、脾、肺、肾组织光镜下未见明显炎性细胞浸润.④外源性的UC-MSCs主要分布在肺和脾脏,其次是肾脏和心肌,肝脏几乎没有.UUO+MSCs组脾脏的UC-MSCs明显少于Sham+MSCs组(P＜0.01),但肾脏的UC-MSCs却多于Sham+MSCs组,而且UUO+MSCs组的左肾UC-MSCs主要分布在肾间质,Sham+MSCs组的肾脏UC-MSCs却主要分布在肾小球.结论：①异种UC-MSCs静脉移植是安全可行的.②异种UC-MSCs静脉移植到梗阻性肾间质纤维化大鼠后能归巢到受损的肾组织.