Mitf-M在羊驼皮肤组织的表达与序列分析及免疫组织化学定位

摘要

目的：克隆羊驼皮肤组织表达的Mitf-M基因CDS序列,比较分析羊驼皮肤组织Mitf-M基因的特征,进一步定位分析Mitf-M蛋白表达的位置,为深入研究羊驼毛色基因表达机制奠定基础.方法：采用RT-PCR扩增方法分段扩增Mitf-M CDS区,分别利用Clustal X和BioEdit生物学软件对氨基酸序列进行多重序列比较分析,免疫组织化学技术对Mitf-M蛋白定位分析.结果：羊驼皮肤组织表达的Mitf-M基因的CDS区由419个氨基酸组成,具有bHLH-zip转录家族的保守结构域,系统进化分析该基因与牛和犬类亲缘关系最近.免疫组织化学分析Mitf-M主要分布于羊驼皮肤组织毛球基底层细胞之间与毛乳头周围的黑色素细胞中.结论：羊驼皮肤组织表达的Mitf-M基因与其他物种相比较,保守性很强,表明羊驼Mitf-M这一基因在进化过程中变异不大,说明Mitf-M在转录调控方面起着重要的作用,进一步的定位分析表明Mitf-M为毛发的色素沉积提供重要的物质基础.