应用哺乳动物细胞进行人IL-4的高效表达

摘要

本课题组进行了人白细胞介素4(IL-4)的基因克隆并在二种哺乳动物细胞进行了高效表达.该课题组用32P-r-ATP末端标记人工合成的人IL-4探针并建立cDNA文库，经和该文库的2106个嗜菌斑进行斑点杂交，筛选到2个阳性克隆，该课题组还将IL-4 cDNA插入pdKCR质粒SV40启动子下游，构建成重组质粒pdKhIL-4,再回收SV40启动子，cDNA，兔-globin基因片段，然后和质粒pdBPV 169%的大片段拼接。应用哺乳动物细胞进行人IL-4持续，高效的表达将避免大肠杆菌表达的诸多缺点，重组的IL-4在结构和功能上更接近天然的IL-4,此方法为在真核细胞进行基因的功能研究和表达调控创造了相应的条件。