IBV DNA疫苗重组质粒pVAX1-S1在大肠杆菌DH5α中的稳定性研究

摘要

为保证DNA疫苗的质量，需要对重组质粒pVAX1-S1在重组大肠杆菌DH5α中的稳定性进行研究。成功构建了含IBV S1基因的真核表达质粒pVAX1-S1，将含有质粒pVAX1-S1的基因工程菌DH5α分别在含有和不含卡那霉素(Kan)的LB平板上划线接种连续传代。结果表明，在含有Kan的LB平板上连续传代100代后，质粒的目的基因片断没有缺失，具有结构稳定性;但在无抗生素选择压力下，连续传代20代开始出现质粒丢失的细胞，连续传代100代后80％的细胞含有正常质粒。结论：本实验构建的IBV真核表达质粒pVAX1-S1在宿主菌DH5α中具有稳定性，为进一步扩大生产提供技术支持。