利用反转录聚合酶链式反应检测H5亚型禽流感病毒的研究

摘要

目的：利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测H5亚型禽流感病毒(AIV)。 方法：在Genbank中搜索H5亚型禽流感病毒的血凝素基因序列，设计了1对针对H5亚型AIV的特异性引物，这对引物所扩增的cDNA片段大小为427bp，并且对RT-PCR反应体系进行优化。 结果：该RT-PCR对H5亚型AIV能扩增出1条大小为427 bp的cDNA片段，将回收产物的测序结果在BLAST上进行序列相似性比较，提示这些扩增基因的序列是H5亚型AIV的HA基因。扩增结果表明与其他常见禽病病原的核酸不存在交叉反应。该RT-PCR对H5亚型AIV cDNA的最低检出量为10pg。 结论：成功建立了快速检测H5亚型AIV的RT-PCR技术。