水貂阿留申病毒主要VP2基因的原核表达

摘要

根据GenBank中已发表的水貂阿留申病毒(ADV)VP2基因核苷酸序列设计合成1对特异引物，利用PCR方法扩增ADV国内分离株部分VP2基因片段，将其克隆到原核表达载体pET-28a的多克隆位点中。经酶切、PCR扩增和测序分析证实其已正确插入到表达载体中，构建原核表达载体pET-28a-VP2。阳性重组质粒转化宿主菌BL21，用IPTG进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE检测和免疫印迹分析。结果表明蛋白获得了表达，表达产物的分子质量为21KD，与理论推测的分子质量一致;终浓度为1mmol/L的IPTG诱导下，5h时其表达量达到高峰;Westernblot分析表明表达蛋白能被兔抗水貂抗体所识别，具有相应的抗原性。