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人源性抗甲型肝炎病毒Fab噬菌体抗体分子的初步筛选

摘要

目的:从自建的大容量非免疫Fab噬菌体抗体库中筛选具有抗甲型肝炎病毒(HAV)抗原活性的噬菌体抗体,并进行鉴定。 方法:采用纯化的甲型肝炎病毒作为包被抗原,对自建的容量为1.26×1011pfu/ml的Fab噬菌体抗体库进行富集和筛选,分别对原始库和筛选后的抗体库进行Phage-ELISA检测。经酶切鉴定和DNA测序分析后进行蛋白表达. 结果:经2轮筛选,抗HAV抗原的噬菌体抗体得到了明显富集,ELISA实验证实具有良好的抗甲肝病毒抗原特异性。SDS-PAGE检测显示Fab抗体蛋白在E coll DHsa中得到了表达. 结论:从自建的非免疫Fab噬菌体抗体库中成功获得了抗甲肝病毒噬菌体抗体,也表明所构建的非免疫抗体库可用于人源性抗体的筛选应用。

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