表达并运送重大禽病病毒蛋白的转基因球虫体系——一种高效诱导保护性黏膜免疫和细胞免疫的大容量活载体疫苗生产体系

摘要

随着人们对药物残留和耐药病原的产生等日趋严峻的问题的关注以及生命科学的巨大进步，科学界在疫病新型防控策略的研究，尤其在新型疫苗的研究方面进行着努力的探索.基于预防鸡球虫病的活卵囊疫苗的广泛使用和分子生物学的飞跃发展，我们设想利用鸡球虫建立一个转基因系统，即将具有良好免疫原性的病毒基因整合到弱毒的鸡球虫早熟株(系)基因组中(可以用7个种的鸡球虫中分别建立表达不同病毒抗原蛋白基因的转基因球虫)，得到一个或多个能稳定表达外源病毒基因的转基因球虫系.由于活卵囊疫苗在田间使用时，球虫在鸡体内经4～7天的细胞内发育即排出体外，一般再经过三次的自然重复感染即使鸡产生对球虫的"绝对"抵抗--那么转基因球虫作为疫苗接种鸡之后也会重复上述的繁殖过程，这时转基因球虫所携带的外源病毒抗原基因将表达四次，从而多次诱导肠道黏膜免疫和细胞免疫的产生.这样的结果即相当于给鸡进行了四次病毒病疫苗的免疫，第一次为初次免疫，而后三次为加强免疫，这很可能刺激机体产生有效的抗病毒保护效果，从而达到一苗两用或多用的目的.这种转基因球虫体系作为活疫苗载体生产系统较之其他真核细胞及病毒、细菌的疫苗载体系统具有独特优势，最明显的是体现球虫核基因组大小达到了60Mb，可容纳大片段的外源基因；而且转基因球虫的生物安全性高、生产与接种简单易行.在参考顶复合门寄生原虫转基因研究的基础上，本文介绍研究小组正在进行的转基因球虫体系建立的初期研究工作。