异体CD3AK细胞对慢性髓细胞白血病细胞株及原代白血病细胞的体外杀伤作用

摘要

目的：观察CD3AK细胞对残留的慢性髓细胞白血病(chronic myelogenous leukemia，CML)细胞株及原代白血病细胞的体外净化作用. 方法：采用固化的抗CD3单克隆抗体联合小剂量IL-2诱导CD3AK细胞；流式细胞仪(flow cytometry)检测CD3AK细胞的表型变化；MTT法观察CD3AK细胞对K562、HL60细胞株的体外杀伤作用；RT-PCR检测模拟残留白血病条件下的 K562细胞株及CML患者原代白血病细胞经CD3AK细胞净化后bcr/abl 融合基因mRNA的表达变化；肿瘤细胞集落培养(tumor colony assay， TCA)观察CD3AK细胞对K562细胞集落形成的抑制作用. 结果：3-5ug/ml固化抗CD3单克隆抗体联合100U/ml IL-2可有效激活CD3AK细胞，细胞表型分析显示CD3+细胞占99.51％.MTT法显示CD3AK细胞在体外对K562细胞、HL60细胞有较强的杀伤力，杀伤作用与效靶比呈强相关.RT-PCR显示残留K562细胞及CML患者原代肿瘤细胞经CD3AK细胞净化后bcr/ablmRNA的表达下调.白血病细胞集落培养提示CD3AK细胞对K562细胞集落有明显的抑制作用. 结论：CD3AK细胞在体外对残留CML细胞株及原代白血病细胞有较强的净化作用.