新型AMPK激动剂IMM-H007抑制巨噬细胞源泡沫细胞形成的作用机制研究

摘要

目的：本研究旨在观察IMM-H007对巨噬细胞源泡沫细胞形成及动脉粥样硬化早期动脉壁脂纹的影响，并进一步探讨其可能的作用机制。方法与结果：利用细胞Oil Red O染色及Filipin荧光染色证实IMM-H007能抑制oxLDL诱导的小鼠J774巨噬细胞泡沫化，细胞内脂质分析结果表明IMM-H007显著降低细胞内胆固醇水平。利用流式细胞技术进行Dil-oxLDL结合分析，证实IMM-H007能明显抑制J774细胞摄取oxLDL。利用荧光实时定量PCR,Western Blot及细胞免疫荧光技术证实IMM-H007可明显抑制J774细胞中清道夫受体LOX-1转录和翻译水平的表达，且不影响CD36与SR-A的表达。利用siRNA技术及AMPK抑制剂Compound C干预证实IMM-H007可能通过激活AMPK介导其对LOX-1的调控作用，进一步的研究表明IMM-H007能明显增加IKB表达，并抑制NF-KB活性。在ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型中，病理学结果表明IMM-H007能显著减少主动脉斑块面积，抑制泡沫细胞沉积于动脉壁从而预防动脉粥样硬化病灶的初步形成，免疫组化结果表明主动脉根部CD68表达减少，主动脉壁p-AMPK表达增加，LOX-1表达降低。结论:本研究在细胞水平证实了IMM-H007可能通过抑制巨噬细胞对oxLDL的摄取从而抑制泡沫细胞形成，在动物模型中IMM-H007可抑制泡沫细胞沉积动脉壁，缓解动脉粥样硬化的早期病变。其机制可能与IMM-H007激活AMPK抑制LOX-1的表达相关，同时该过程可能有NF-KB信号通路参与。