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树鼩IL-2 TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要

目的:建立检测树鼩IL-2基因TaqMan探针实时荧光定量PCR方法.方法:以经ConA诱导培养的树鼩淋巴细胞总RNA为材料,设计特异性引物,通过RT-PCR技术克隆出树鼩IL-2基因,以构建的树鼩IL-2基因质粒为标准品,建立标准曲线,并进行灵敏度检测.结果:建立了树鼩IL-2基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法,此法检测灵敏度高,线性范围可达102~109拷贝/ul.结论:成功建立了树鼩IL-2实时荧光定量PCR方法,此方法灵敏度高、特异性强,检测周期短,为探讨IL-2作用的分子作用机制奠定基础.

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