家蝇幼虫血淋巴抗真菌肽MAF-1的分子特性分析及其抗真菌作用

摘要

制备家蝇Musca domestica幼虫血淋巴中的抗真菌肽，对其分子特性及抗真菌机制进行研究。通过C18柱固相萃取、反相高效液相色谱相缝合的方法，成功制备到家蝇幼虫血淋巴抗真菌肽MAF-1.SDS-PAGE分析结果表明，MAF-1的分子量为17.136 kDa。通过圆二色谱测出水溶液中MAF-1主要以a螺旋及β折叠为主。扫描电镜观察结果显示，MAF-1作用白假丝酵母菌Candida albicans 1 h后，部分真菌出现表面凸凹不平,细胞结构模糊；随着作用时间的延长，表面形成很明显的凹陷,皱缩,个别菌体破裂,内容物外泄,病变真菌发生率高于对照组。单细胞凝胶电泳(single-cell gel electrophoresis,SCGE)结果显示,正常对照组的真菌呈现典型的圆形,而实验组则出现明显的拖尾现象即形成“彗星”样细胞特征，细胞迁移距离明显高于对照组。SDS-PAGE图谱显示,MAF-1作用后的自假丝酵母菌菌体蛋白谱带一些条带明显变浅，条带数下降,甚至消失。以上结果提示，MAF-1可能具有独特的抗真菌机制。