关于番茄黄化曲叶病毒CP基因的原核表达载体构建选择的研究

摘要

近年来，在全国各地相继发现一种毁灭性的番茄新病害—番茄黄化曲叶病毒病，本研究利用原核表达载体pET-32a(+)和pET-28a(+)成功构建了番茄黄化曲叶病毒(Tomato Yellow Leaf Curl Virus,TYLCV)外壳蛋白(Coat Protein,cP)基因的重组质粒p32a-CP和p28a-CP,并通过PCR和双酶切鉴定了序列连接的正确性,测序结果也表明TYLCV-CP基因已定向插入p32aCP和p28a-CP中,再分别将两载体转化至BL21(DE3)中,采用不同浓度的IPTG对其进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示分子量约为50kD的目的蛋白在重组载体p32a-CP中得到了高效表达,而在重组载体p28a-CP中没有表达.