蚜肠霉素处理及细胞传代数对小型猪体细胞核移植胚胎发育的影响

摘要

目的：为优化小型猪体细胞核移植技术(SCNT)技术,探讨供体细胞不同类型、不同传代数以及蚜肠霉素(APC)处理各供体细胞对重构胚体外发育的影响.方法：小型猪输卵管上皮细胞(OEC),耳成纤维细胞(EFC)和卵丘细胞(CC)分别经血清饥饿或血饥饿后再使用0.1μg/mlAPC处理.核移植重构胚体外培养7d,以检测其发育能力.结果：OEC经APC处理后,重构胚的卵裂率和囊胚形成均显著高于仅血清饥饿处理组(61.82％vs56.25％,24.55％vs17.86％;P＜0.05).以EFC为供体细胞,APC组重构胚卵裂率显著高于血清饥饿组(63.36％vs57.01％;P＜0.05).注入CC,APC处理能显著提高重构胚的囊胚形成率(29.63％;P＜0.05).三种细胞经APC处理,CC作为核供体,重构胚的卵裂率和囊胚形成率最高.三种细胞中,无论哪一种作为核供体,其传代数对重构胚的发育没有影响.结论：以CC为供体细胞,血清饥饿后再使用APC处理,更适合小型猪的体细胞核移植。