PRRSV不同毒力毒株诱导Toll样受体和细胞因子表达特性的比较

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因容易变异,不同流行毒株毒力差异较大,造成严重经济损失,但其免疫和致病机制尚不清楚。本研究将24头仔猪平均分成4组,每组6头,分别接种高致病性PRRSV分离株BB0907(HP),低毒力PRRSV毒株NT0801(LP),NT0801第70代衍生毒株NT0801-F70(LP-der)和DMEM营养液(对照),隔离饲养观察。攻毒后0、6、9、15天用ELISA方法检测猪血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ和IL-10含量;攻毒后15天用Real-time PCR方法检测各组肺脏和脑组织中TLR2、3、7和8基因表达水平,并分离猪肺泡巨噬细胞(PAMs)和猪外周血淋巴细胞(PBMCs),分别采用TLR2、3、7/8的配体(LTA、poly(I:C)、CL097)和PRRSV刺激,检测细胞上清中细胞因子水平。结果为:与LP相比，HP组试验猪产生明显临床症状，而LP-der几乎没有毒力;HP感染猪的血清中IL-1β、IL-6、TNF-α和IFN-γ的水平高于LP或者LP-der组。LP组PAMs经poly(I:C)或CL097刺激后分泌的TNF-α和IL-1β水平显著高于DMEM营养液对照组，同时，HP组PBMCs经CL097刺激后分泌的TNF-α、IL-1β和IL-6显著高于LP和LP-der组。HP组PBMCs经CL097刺激后分泌的TNF-α、IL-1β、IL-6高于LP和LP-der组，LP组PAMs经poly(I:C)、CL097刺激后TNF-α和IL-1β的分泌高于DMEM组。该结果表明，与LP和LP-der相比，HP更能诱导TLR3、7、8和TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-γ表达，从而丰富了PRRSV免疫和致病机制理论，并有助于开发更为有效的PRRSV疫苗。