猪白细胞介素-2基因的原核表达及生物学活性研究

摘要

目的：原核表达并纯化猪白细胞介素-2(IL-2).方法：根据GenBank上发表的猪IL-2基因序列,设计并合成引物。从猪外周血淋巴细胞中提取基因组RNA,采用RT-PCR技术,扩增出猪IL-2基因。将猪IL-2基因插入到原核表达载体pBV220并转化到大肠杆菌DH5α中构建原核表达系统poIL-2/pBV220/DH5α,通过温度诱导进行表达。表达产物经SDS-PAGE分析和蛋白纯化后,用MTT/CTLL-2方法进行生物学活性检测。结果：重组表达质粒poIL-2/pBV220经双酶切和测序证明构建正确;表达的目的蛋白相对分子量大小约为17.4KD,与预期大小相符;生物活性检测结果表明,重组猪IL-2生物学活性良好。结论：本研究成功构建了重组原核表达质粒poIL-2/pBV220,成功表达并纯化了具有生物学活性的poIL-2蛋白,为猪IL-2的应用研究和产业化奠定了基础。