牛乳头瘤病毒2型L1基因克隆及原核表达

摘要

为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因。本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆入pMD18-T载体中,测序后进行序列分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆入原核表达质粒pGEX4T-1中,用IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。SDS-PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80ku的重组蛋白;Western blot显示该蛋白可与抗BPV2多克隆抗体发生免疫反应。小鼠免疫试验表明,BPV2 L1重组蛋白可诱导小鼠产生抗BPV2 L1特异性抗体;琼脂扩散试验显示,重组的L1蛋白具有良好的免疫原性。本研究通过原核表达的BPV2 L1蛋白,证实其具有良好的反应原性及免疫原性,为牛乳头瘤病的疫苗和诊断试剂研发奠定了基础。