高浓度氧对肺表面活性蛋白A基因沉默后A549细胞的影响

摘要

目的:探索小分子干扰RNA(SiRNA)沉默A549细胞肺表面活性蛋白A(SP-A)基因后高浓度氧对其的影响,探讨SP-A蛋白在高氧肺损伤中的作用。方法：体外传代培养A549细胞,将细胞随机分为沉默组、对照组.以Lipofectamine2000转染特异性SP-A SiRNA入A549细胞,持续置于高浓度氧(95％O2，5％CO2)中,分别于培养后48 h、72 h、96 h提取A549细胞的总蛋白,收集培养上清.采用western-blot检测SP-A蛋白的表达,MTT检测细胞增殖能力,硫代巴比妥酸(TAB)比色法检测培养基上清中丙二醛(MDA)含量。结果：高浓度氧干预下，与对照组相比，沉默组A549细胞增殖能力明显下降，但两组间培养基中MDA未见明显差异。结论：SP-A基因沉默后A549细胞抗高氧能力下降，表明SP-A可能在高氧肺损伤过程起保护作用，但SP-A可能不是通过清除氧自由基达到保护作用。