细胞型朊蛋白在BV2小神经胶质细胞体外激活中的作用

摘要

目的:研究不同激活过程的小神经胶质细胞PrPC表达的情况以及PrPC沉默对小神经胶质细胞三种激活方式的影响.方法:培养BV2小胶质细胞,首先用IFN-γ、IL-4和IL-10分别刺激BV2细胞,分别与6h、12h和24h后提取细胞内RNA并反转录合成cDNA,用RT-PCR方法检测PrPC的mRNA表达量,设定PBS处理组为阴性对照组.通过SiRNA干扰将BV2细胞的PrPC沉默,用RT-PCR 和Western-blot检测干扰效率.再用上述因子分别刺激正常的小神经胶质细胞和沉默后的小神经胶质细胞,提取细胞内RNA 并反转录合成cDNA,再用RT-PCR检测相关参数,设定PBS处理组为阴性对照组.结果:用IFN-γ、IL-4和IL-10分别刺激小神经胶质细胞6 h、12 h和24h后,小神经胶质细胞的PrPC的mRNA表达量下降;PrPC沉默后的小神经胶质细胞对IFN-γ刺激的反应应答减弱;PrPC沉默后可以显著地改变由IL-4诱导的神经胶质细胞的激活表型;但是对IL-10诱导的小神经胶质细胞激活没有影响.结论:小神经胶质细胞的不同激活方式总是伴随着PrPC的下调表明PrPC可能直接参与维持小神经胶质细胞的静止状态,PrPC表达下调可能是小神经胶质细胞从静止状态转向激活状态的一个必要条件.PrPC沉默对小神经胶质细胞不同激活方式的影响表明PrPC的作用不仅仅局限于参与小神经胶质细胞从静止状态到激活状态的转变,它的作用甚至远远超出参与调节小神经胶质细胞的激活过程.朊蛋白可能在维持以上两种相反作用的激活方式平衡过程中发挥重要的调节作用.PrPC在小神经胶质细胞从静止状态到激活状态的转换过程中起着调节作用,并且还可以维持被激活的小神经胶质细胞的炎症反应过程和抗炎的组织修复过程的平衡.