小鼠早期胚胎发育过程中5-羟甲基胞嘧啶与DNA主动去甲基化关系的研究

摘要

本文以小鼠为研究对象，通过分析ShmC在合子和早期植入前胚胎中的分布以及甲基化质粒在早期胚胎中的变化，得到如下结果:(1)在合子中，雌雄原核SmC和ShmC表现出不对称的分布，而在孤雌原核时期胚胎两个原核中SmC和ShmC染色信号一致，并没有观察到不对称的分布;(2)甲基化质粒在受精和孤雌胚胎中能够发生主动去甲基化，在注射后50h时能够观察到甲基化质粒的蛋白水平表达。在注射后的胚胎中绿色荧光的表达呈现出嵌合的表达模式，并且受精胚胎中绿色荧光蛋白阳性胚胎数明显高于孤雌胚胎。在甲基化质粒去甲基化过程中，质粒启动子区域内能够检测到ShmC的存在;(3)Tet3基因在MII期卵母细胞和合子时期表达量较高，随着胚胎的发育其表达量逐渐下降，Tet1和Tet2基因在合子时期和植入前胚胎中表达量较低。在植入前胚胎中，甲基化和去甲基化过程是共同存在的，并且是一个动态变化的过程，4细胞到8细胞发育过程中LINEI原件的总甲基化程度和ShmC含量发生明显的降低，但是囊胚阶段内细胞团中甲基化和轻甲基化程度出现升高的趋势。本研究结果对于深入研究DNA主动去甲基化的机制提供了理论依据。