水对创伤性脑损伤大鼠脑创伤区CD34表达的影响

摘要

目的：观察富氢水对创伤性脑损伤(TBI)大鼠创伤周围脑组织CD34表达及新血管生成的影响. 方法：将54只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、创伤组(TBI组)及创伤+富氢水组(TBI+HW组)3组,每组再按伤后不同时间点分为1、3、7d3个亚组,每个亚组6只.采用改良Feency自由落体撞击法制作脑外伤模型;Sham组开颅窗后不给予颅脑撞击.TBI+HW组于制模后立即腹腔注射富氢水5mL/kg,之后每日腹腔注射1次,直至处死;Sham组和TBI组均给予等量生理盐水.于伤后相应时间点进行神经损伤评分(NSS);断头处死大鼠,取创伤边缘3mm内脑组织,苏木素-伊红(HE)染色后光镜下观察创伤周围脑组织病理学改变;采用免疫组化法观察CD34+细胞表达,以反映创伤周围脑组织新生毛细血管芽增生情况;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测创伤周围脑组织CD34蛋白表达. 结果：Sham组各时间点NSS评分均为0;TBI组和TBI+HW组大鼠伤后NSS评分随时间延长逐渐降低,以TBI+HW组降低更为显著,3d、7d NSS评分均显著低于TBI组(分：3d为8.67±0.52比11.561.94,7d为7.33±0.52比8.17±0.98,均P＜0.05).光镜下显示,Sham组大鼠脑组织形态正常;TBI组伤后脑组织出血、坏死明显,创伤周围脑组织水肿,有大量变性坏死的神经细胞和炎性细胞浸润,以伤后3d最为显著;TBI+HW组水肿区范围较TBI组稍有缩小,周围水肿稍有减轻.免疫组化显示,Sham组仅有极少量新生毛细血管增生;TBI组随伤后时间延长,创伤周围脑组织新生毛细血管增生逐渐增多;TBI+HW组新生毛细血管增生更为显著,伤后3d和7d新生毛细血管数明显多于TBI组(个/HP：3d为10.59±1.88比8.61±1.22,7d为23.20±3.16比17.01±2.64,均P＜0.05).Western Blot显示,与Sham组比较,TBI组伤后各时间点CD34蛋白表达明显上调.TBI+HW组伤后1d及3d CD34蛋白表达较TBI组稍有上调,但差异无统计学意义;伤后7d CD34蛋白表达较前明显上调,且显著高于TBI组(灰度值：1.36±0.36比0.74±0.08,P＜0.05). 结论：富氢水能够促进TBI大鼠CD34+内皮祖细胞动员、归巢到创伤区域,参与新生血管生成,从而改善神经功能.