西藏小型猪GHR基因的克隆测序分析

摘要

目的：克隆西藏小型猪的肝脏组织中的GHR基因的cDNA序列,并与Pubmed中查询到的版纳微型猪、五指山小型猪的cDNA进行比对分析. 方法：提取了西藏小型猪肝脏组织的总RNA,应用RT-PCR技术扩增GHR基因的cDNA序列,将这个基因克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-GHR,进行测序分析. 结果：克隆得到了西藏小型猪GHR基因的cDNA序列,发现西藏小型猪GHR基因的片段长1912bp,包含编码区1721bp,该编码区编码了572个氨基酸,与版纳微型猪、五指山小型猪的GHR基因高度同源达99％.将西藏小型猪GHR基因的编码区与GenBank中搜索到猪的GHR基因的cDNA序列进行比对分析发现,在1225pb处发生了T→G的突变,该位点的突变引起相应编码氨基酸的变化,由丝氨酸变成了丙氨酸. 结论：为西藏小型猪的生长发育机制研究提供分子理论依据,位点的突变引起相应氨基酸的变化是否是导致西藏小型猪矮小的原因需要进一步论证.