猪生长激素自分泌作用机制研究

摘要

生长激素(growth hormone,GH)是由脑垂体前叶分泌的一种促进机体合成代谢和蛋白质合成的多肽激素.随着对GH内分泌效应研究的深入,研究结果显示出GH不仅在生长轴内分泌调控机制中发挥着主导作用,还可能通过自分泌(autocrine)作用于产生细胞因子的细胞本身,调节细胞因子活性,在局部发挥效应.本研究构建了pGH过表达载体,并设计了2条用于pGH基因沉默的siRNA,转染细胞后观察对细胞及线粒体相关功能的影响.western blot检测结果表明,和正常细胞组相比,GH siRNA转染细胞组和GH过表达细胞组中GH表达水平分别下降约53％和增加63％,各组间差异及显著(P＜0.01).利用细胞流式术对细胞周期进行检测发现,GH过表达及表达下降后对细胞周期及凋亡均有显著影响,各组间差异及显著(P＜0.01).GH表达变化在对线粒体形态学及功能均有重要影响.GH过表达后,电镜检测发现细胞内线粒体数量显著增加,细胞活性氧ROS及膜电位均有明显增加,组间差异显著(p＜0.05).初步研究结果表明,猪pGH对细胞生长周期、凋亡及线粒体功能均有有显著影响.本研究为日后研究pGH在细胞自分泌作用机制中的影响奠定基础.