巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri(Hughes)卵黄蛋白原基因克隆及抗敏品系表达差异分析

摘要

巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri(Hughes)是叶螨、粉虱及蓟马的重要天敌.选育捕食螨抗药性品系可有效协调捕食螨释放和化学农药施用的矛盾.在筛选出巴氏新小绥螨敏感和抗性品系基础上,本研究比较了巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗/敏品系的产卵量,采用RT-PCR和RACE法对巴氏新小绥螨卵黄蛋白原进行了克隆,采用实时荧光定量PCR法对抗/敏品系卵黄蛋白原表达量进行了测定.结果表明,甲氰菊酯抗性品系的产卵量显著增加.通过克隆首次得到了巴氏新小绥螨N.barkeri3条卵黄蛋白原基因NbVg1、NbVg2、NbVg3cDNA全长,保守结构域分析结果表明其均具备卵黄蛋白原典型结构域即氨基端的Vitellogenin_N结构域或脂蛋白N端结构域(LPD_N),未知功能的结构域(domain of unknown function)DUF1943和位于羧基端的VWD结构域(von-Willebrand factor type D domain).荧光定量PCR发现,NbVg1、NbVg2在巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗性品系中表达量显著高于敏感品系,而NbVg3则在甲氰菊酯抗性品系中表达下降且显著低于敏感品系.因此推测卵黄蛋白原基因的表达变化可能与巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗性品系产卵量增加有关.