隔药灸对克罗恩大鼠结肠和中枢DA/D1R表达的影响

摘要

目的：DA是免疫系统中一种有效的免疫调节剂,在各种免疫相关疾病中DA浓度和/或DRs表达的改变,导致机体发生不同的免疫过程.本研究旨在观察隔药饼灸天枢穴(双)、气海穴对克罗恩大鼠靶器官结肠、中枢脊髓背角和下丘脑中DA/D1R调节作用,从该角度阐释隔药饼灸治疗克罗恩病的机制. 方法：三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠制备大鼠克罗恩病模型,随机分成1.正常组(Normal Group,NG);2.模型组(Model Group,MG);隔药灸组(Herbal-partitioned Moxibustion group,Mox);4.美沙拉嗪组(Mesalazine,Mesa).隔药灸组取穴天枢(双)、气海;药饼配方：附子、肉桂、丹参、黄连等药研末后加适量黄酒,制成直径1、厚0.5cm大小药饼,上置约小艾炷施灸,每次每穴各灸2壮,每日1次,连续治疗10天.美沙拉嗪组采用美沙拉嗪溶液灌胃,每日2次,共10天.治疗结束后,测定大鼠结肠大体损伤评分,HE染色观察结肠病理改变;免疫组织化学检测大鼠结肠黏膜DA/D1R的表达;ELISA检测大鼠脊髓背角和下丘脑DA/D1R含量;Real-time PCR检测结肠黏膜、脊髓背角和下丘脑D1R mRNA的表达情况. 结果：HE染色结果显示模型组大鼠结肠黏膜层有明显裂隙状溃疡形成,深达黏膜下层,固有层间质、黏膜下层结缔组织明显水肿伴大量淋巴细胞浸润,黏膜下层可见结节病样肉芽肿形成;与模型组比较,隔药灸组和美沙拉嗪组大鼠结肠组织不同程度恢复.免疫组织化学和ELISA结果显示,与正常组比较,模型组结肠、脊髓背角、下丘脑DA/D1R的表达均显著增高(P＜0.01),与模型组比较,隔药灸组和美沙拉嗪组DA/D1R表达均显著降低(P＜0.01,P＜0.05);PCR结果显示,与正常组比较,模型组结肠、脊髓背角、下丘脑D1R mRNA表达显著增高(P＜0.01),与模型组比较,隔药灸组和美沙拉嗪组D1R mRNA的表达均显著降低(P＜0.01). 结论：隔药灸天枢、气海穴能够缓解克罗恩病大鼠结肠炎症,促进结肠组织病理损伤的修复,能够降低克罗恩病大鼠靶器官结肠、中枢脊髓背角和下丘脑组织DA/D1R mRNA的表达,发挥炎症抑制作用,这可能是隔药灸治疗克罗恩病的重要机制之一.