重金属镉离子人工抗原的合成与鉴定

摘要

选用螯合剂Isothiocyanobenzy-EDTA(ITCBE)络合重金属镉离子,再分别与载体蛋白BSA和KLH相连接,初步制备免疫抗原Cd-ITCBE-KLH和检测抗原Cd-ITCBE-BSA.通过BCA法测定完全抗原浓度,并利用SDS-PAGE电泳、紫外分光光度法及石墨炉原子吸收法对所合成抗原进行初步鉴定;BCA法测出Cd-ITCBE-BSA、Cd-ITCBE-KLH及ITCBE-BSA的实际蛋白浓度依次为:1.426、1.504、0.890mg/ml.SDS-PAGE电泳和紫外分光光度法定性的说明抗原合成成功,石墨炉原子吸收法测得完全抗原中镉离子含量最高可达44.56μg/ml,其他无金属抗原、载体蛋白和HEPES中镉离子含量几乎为零,定量的说明了抗原合成成功.