响应面法优化大肠杆菌产海藻糖合酶发酵条件

摘要

运用响应面法对大肠杆菌(E Coli)产海藻糖合酶发酵条件进行了优化.根据单因素试验结果,利用Plackett-Burman进行两因素两水平设计对影响其产酶因素进行评估并筛选出具显著效应的3种因素:葡萄糖、酵母浸粉和K2HPO4.用最陡爬坡试验逼近以上三种因素的最大响应面区域后,采用Box-Behnken进行三因素三水平的设计以及响应面分析,获得最佳产海藻糖合酶的培养基和培养条件组成.结果表明,发酵大肠杆菌的最佳产酶条件为:葡萄糖8.3g/L,酵母浸粉6.3g/L,蛋白胨10g/L,(NH4)2SO45g/L,K2HPO413.7g/L,KH2PO44g/L,MgSO4·7H2O1.6g/L,微量元素0.5mL/L,转速200rpm,温度37℃.在此条件下进行产酶重复试验5次,海藻糖合酶转化率为65％,比优化前提高了91.2％.