桂花查耳酮合酶CHS基因的克隆及序列分析

摘要

以桂花[Osmanthusfragrans(Thunb.)Lour.]'丹桂'品种为试材,采用RT-PCR和RACE方法从花瓣中获得了一个丹桂查耳酮合酶(chalcone synthase,CHS)基因cDNA全长.利用在线分析软件进行核苷酸序列以及氨基酸序列的分析.克隆获得的基因全长为1383bp,包含48bp的5'非编码区、162bp的3'非编码区和一个长度为1173bp编码391个氨基酸的开放阅读框.序列分析表明该基因具有Cys164、His303和Asn3363个活性位点及2个决定底物特异性的苯丙氨酸残基Phe215,Phe265.该基因也具有查尔酮合酶家族的特征多肽序列.Blast序列分析显示该基因与同属木犀科的油橄榄相似性达92％,与其他双子叶植物的相似性在72％-76％左右,系统进化分析表明,该基因聚类具有明显的种属特性,桂花与唇形科等植物的CHS亲缘关系较近,相似性达76％以上,符合植物分类学分类.