貉源犬瘟热病毒CDV-ZC株分离、鉴定及全基因组测序与分析

摘要

应用Vero细胞从山东省诸城市疑似犬瘟热感染貉的肝脏、脾脏、肺脏等组织病料的研磨上清液中分离出1株病毒.分离株经Vero细胞传至第4代出现典型的细胞病变效应,经毒力测定、血清学、RT-PCR检测及基因测序、回归动物试验证实为犬瘟热病毒,命名为ZC株.采用RT-PCR方法分段克隆分离株的全基因组序列并测序,依次拼接得到全基因组序列进行序列比对分析.结果表明,CDV-ZC株全基因(GenBank登录号KJ994343)与美洲基因型犬瘟热强毒株A75/17核苷酸同源性高达96.5％,而与疫苗株Onderstepoort、CDV3等亲缘关系较远,同源性为91.6％-92.0％.血凝素基因序列分析表明,CDV-ZC株与国内野毒株LN(13)2、GP株等以及日本野毒株UENO、HAMA等共同归属于Asia-1基因型,在H蛋白信号淋巴细胞激活因子受体结合区的542-544位增加了1个潜在N-连接糖基化位点.致病性强毒株CDV-ZC的成功分离及全基因序列测定加深了对当前中国CDV流行株遗传变异情况的了解,对CD的有效预防、诊断及控制具有指导意义.