环境污染物镉通过调节前列腺癌细胞中雄激素受体的类泛素化修饰增强其转录活性

摘要

目的:本课题以AR为切入点,从类泛素化修饰角度,研究环境污染物镉(Cadmium,Cd)致前列腺癌的可能机制.材料方法:选择CdCl2为研究对象,用AR表达阴性的人胚肾HEK293T细胞和AR表达阳性的前列腺癌LNCaP细胞分别就Cd对外源性和内源性AR转录活性的影响进行研究.用流式细胞技术分析Cd对细胞周期的影响;用双荧光素酶试验检测Cd对AR转录活性的影响;用Realtime PCR和Western blot方法检测Cd对AR及其下游正调控靶基因PSA以及SENPI的表达;用Co-IP方法检测Cd对AR类泛素化修饰水平的影响.结果:Cd可以通过增加受AR调控的周期相关基因的表达,促进前列腺细胞的增殖.荧光素酶试验和基因表达分析发现,发现Cd可增强AR的转录活性及其下游靶基因PSA的表达,但对AR本身的表达量无明显影响,这表明Cd过可能通过翻译后修饰影响AR的活性.鉴于此检测了Cd对可破坏AR类泛素化的特异性蛋白酶1mRNA和蛋白表达水平的变化,发现Cd增加SENP1的表达;将SENP1的表达敲降后,AR的转录活性及PSA的表达随之降低;进一步用Co-IP试验检测到Cd处理后AR的类泛素化水平降低.结论:以上结果表明,Cd通过上调去类泛素化酶SENP1,降低AR的类泛素化修饰水平,增强AR的转录活性,促进前列腺癌的发生.