黄瓜花叶病毒运动蛋白基因及其缺失突变体大肠杆菌中的表达和特异抗血清制备

摘要

利用黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）Ｆｎｙ株系ＲＮＡ３全长ｃＤＮＡ克降，构建了５’商缺失和３’端缺失的运动蛋白（ＭＰ）基因的原核表达载体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明，经ＩＰＴＧ诱导，全长的及５’端缺失和３’端缺失的ＭＰ基因均能在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中高效表达。利用分离包涵体的方法，提纯了全长的Ｃ端缺失的ＭＰ。光密度扫描分析表明，提纯的ＭＰ纯度达９６℅。利用提纯的ＭＰ免疫家兔，制备了ＭＰ及其两种缺失突变体的持异抗血清。