一种有效的提高重组Pfu DNA聚合酶产量的过程强化诱导策略

摘要

Pfu DNA聚合酶从生活于海底火山口附近的超嗜热古生菌Pyrococcus furiosus 中分离得到.最初的聚合酶直接从菌体中直接分离,但由于古细菌需要厌氧培养,生长温度在100℃左右很难培养从而难以获得大量的酶.Pfu DNA聚合酶具有3′-5′外切酶活性,出错的机率仅为Taq DNA聚合酶的1/10,是保真性最好的DNA聚合酶之一,被广泛应用于分子生物学的各种研究中。IPTG是一种十分有效的乳糖操纵子的诱导剂，但其价格较为昂贵，为了减少IPTG用量，采用多次少量的添加策略进行诱导表达。