成骨细胞特异性敲除Ezh2基因不影响小鼠骨骼发育

摘要

骨骼是脊椎动物起支撑、保护和运动作用的器官,骨骼的正常发育对于机体正常发育非常重要.Ezh2(enhancer of zeste homolog2)是一种重要的组蛋白甲基转移酶,通过形成PRC2(polycomb repressive complex2)复合体完成对组蛋白H3第27位赖氨酸(H3K27)甲基化修饰发挥基因沉默的作用.近年来研究表明,Ezh2对于组织器官的早期形成发育以及肿瘤的形成起关键作用,而Ezh2在骨骼系统发育中的功能则未见报道.利用之前构建的成骨细胞特异性表达的Cre转基因小鼠(Col1a1-cre)和Ezh2条件基因敲除小鼠(Ezh2fl/fl)进行交配得到成骨细胞中特异性Ezh2基因敲除小鼠.对胚胎13.5天和17天以及出生后1周、4周、12周和24周Ezh2条件敲除小鼠进行表型分析发现，小鼠骨骼发育正常。组织形态学研究表明，Ezh2敲除小鼠骨小梁数量以及分布，成骨细胞以及破骨细胞相对数量，骨形成率以及骨矿化率与野生小鼠相比无统计学差异。进一步的功能学测试显示Ezh2敲除小鼠骨骼与野生小鼠相比无明显差异。通过原位杂交实验，也发现Ezh2敲除小鼠成骨细胞特异性分子标志Ⅰ型胶原（Col1a1）、骨钙素（Oc）以及骨基质主要结构蛋白骨涎蛋白（BSP）含量以及分布无明显变化。综上所述，利用成骨细胞（Col1a1-cre）特异性敲除Ezh2基因对于小鼠骨骼的形态以及功能无显著影响，因此成骨细胞特异性敲除Ezh2基因不影响小鼠骨骼发育。